Introduction: dengue is considered to be the most important arthropod-borne human disease worldwide, with an estimated 100 million new cases per year and more than 20 000 deaths. The pathogenesis of severe dengue is not fully understood. However, certain studies have associated it with sequential infections by different viral serotypes, memory T cell activation and cytokine hyperproduction. Objectives: determine the qualitative expression of genes of cytokines IFNγ and TNFα in spleen and liver tissues from dengue 3 and 4 fatal cases, detecting RNAm and verifying their role in the pathogenesis of the disease. Methods: the study was conducted by retrotranscription and polymerase chain reaction (RT-PCR) using specific primers. Results: expression of IFNγ predominated over that of TNFα, and was more evident in spleen than in liver tissues. Conclusions: results support the pathogenic role of the Th1 response pattern in severe dengue. This is the first study of its type about dengue infection.

Introducción: el dengue es considerada la enfermedad viral transmitida por artrópodos de mayor importancia en el humano a nivel global, con un estimado de 100 millones de infecciones anuales y más de 20 000 muertes. La patogénesis de la enfermedad grave por dengue no está totalmente esclarecida. Sin embargo, existen estudios que la asocian con infecciones secuenciales por diferentes serotipos virales, activación de células T de memoria e hiperproducción de citocinas. Objetivos: determinar la expresión cualitativa de genes de las citoquinas IFNγ y TNFα en tejidos de bazo e hígado de casos fatales por dengue 3 o dengue 4 mediante la detección de ARNm y comprobar su papel en la patogénesis de la enfermedad. Métodos: El estudio se realizó a través de un método de retro-transcripción y reacción en cadena de la polimerasa (RT-PCR) con el uso de cebadores específicos. Resultados: la expresión de IFNγ predominó a la de TNFα, y fue más evidente en los tejidos de bazo que del hígado. Conclusiones: los resultados obtenidos apoyan el papel patogénico del patrón de respuesta Th1 en el dengue grave y constituye el primer estudio realizado de este tipo en la infección por dengue.

Introduction: the possible role of mast cells in the pathogenesis of dengue infection has been speculated upon for years, due to its broad distribution in tissues. However, the role of mast cells in relation to dengue infection has not been explored properly. Objective: evaluate the behavior of platelets in Balb/c mice, deficient in peritoneal masts cells, in which secondary infection is reproduced. Methods: the behavior of platelets was evaluated in an animal model based on Balb/c mice in the presence or absence of peritoneal mast cells. Results: results show a significant decrease in platelets, associated to the presence of mast cells (p= 0.0155). Conclusions: results suggest a possible pathogenic role of mast cells in dengue infection.

Introducción: durante años se ha especulado sobre el posible papel de los mastocitos en la patogenia de la infección por dengue, debido a su extensa ubicación en los tejidos. Sin embargo, su papel en relación con esta infección no ha sido bien explorado. Objetivo: evaluar el comportamiento de las plaquetas en el ratón Balb/c, deficiente de mastocitos peritoneales, en el cual se reproduce la infección secundaria. Métodos: se evaluó el comportamiento de las plaquetas en un modelo animal en ratón Balb/c en presencia o ausencia de mastocitos peritoneales. Resultados: se constató una disminución significativa de las plaquetas asociada a la presencia de los mastocitos (p= 0,0155). Conclusiones: los resultados sugieren que los mastocitos pudieran tener un papel patogénico en la infección por dengue.

In this work, tomato pomace, a waste abundantly available in the Mediterranean and other temperate climates agro-food industries, has been used as raw material for the production of some hydrolytic enzymes, including xylanase, exo-polygalacturonase (exo-PG), cellulase (CMCase) and α-amylase. The principal step of the process is the solid state fermentation (SSF) of this residue by Aspergillus awamori. In several laboratory experiments, maximum xylanase and exo-PG activities were measured during the first days of culture, reaching values around 100 and 80 IU/gds (international units of enzyme activity per gram of dried solid), respectively. For CMCase and α-amylase production remained almost constant along fermentation, with average values of 19 and 21.5 IU/gds, respectively. Experiments carried out in a plate-type bioreactor at lab scale showed a clear positive effect of aeration on xylanase and CMCase, while the opposite was observed for exo-PG and α-amylase. In general, xylanase was the enzyme produced in higher levels, thus the optimum conditions for the determination of the enzyme activity was characterized. The xylanase activity shows an optimum pH of 5 and an optimum temperature of 50 ºC. The enzyme is activated by Mg2+, but strongly inhibited by Hg2+ and Cu2+. The enzymatic activity remains quite high if the extract is preserved in a range of pH from 3 to 10 and a temperature between 30 ºC to 40 ºC.

The cellular immune response to dengue type 2 virus envelope protein was studied. To this end, the lympho-proliferative capacity of T-lymphocytes obtained from splenocytes of animals inmunized with the protein when they were stimulated by such protein and dengue 2 virus. It was realized that splenocytes proliferated significantly in response to both types of viral antigens and that the values of stimulation indexes were higher in response to the whole virus than to the protein alone. Based on the above-mentioned, it was concludes that purified dengue 2 virus envelope protein was capable of generating specific and memory responses of antigen T-cell to dengue 2 type virus.

Se estudió la respuesta inmune celular a la proteína de envoltura del dengue 2. Para ello se evaluó la capacidad linfoproliferativa de linfocitos T obtenidos a partir de esplenocitos de los ratones inmunizados con dicha proteína al ser estimulados con la proteína en cuestión y con virus dengue 2. Se pudo comprobar que los esplenocitos de los animales inmunizados con la proteína de envoltura del virus dengue 2 proliferaron significativamente en respuesta a ambos tipos de antígenos virales, por lo general, fueron más altos los valores de los índices de estimulación en respuesta al virus completo que a la proteína. De lo anterior se concluyó que la proteína de envoltura del virus dengue 2 purificada es capaz de generar respuesta de células T antígeno específica y de memoria contra el virus dengue 2.